可移动物镜显微镜(MOM)是一种双光子或三光子显微镜,当与适当的激光结合时,能够在活体样本内部深处成像。Sutter MOM是第一台提供三维物镜移动和旋转的示波器,允许样本保持水平和静止。世界各地许多备受推崇的成像实验室都使用Sutter MOM,我们不断与客户合作,根据他们不断变化的需求调整设计。
观看描述MOM成像和光刺激光路的视频
MOM光机设计
MOM由两台独立的显微镜组成。显微镜的宽视场部分由奥林巴斯垂直照明器、萨特氙弧灯和摄像机支架组成,以提供标准的落射荧光。显微镜的双光子侧提供了光路,用于将来自工作台的激发激光向上引导到扫描检流计反射镜中,然后通过扫描透镜扩展光束并引导到物镜的背面。在双光子激发之后,发射的光子被物镜正上方的分色镜引导到检测路径中。显微镜的主体在轨道系统上向后移动,便于在成像前接触样本。
物镜在X、Y和Z方向平移,并绕X轴旋转。两个移动反射镜使显微镜能够保持激发光有效地传递到物镜的后光圈,而不管移动或方向如何。所用的X、Y和Z移动与我们MP-285显微操作器中的相同,因此您知道移动是平滑的、精确的、无漂移的和高度可再现的。这些移动允许在不需要移动载物台的情况下记录大面积组织的Z叠置组件和镶嵌图像。
水平光路允许物镜旋转离开标准垂直位置。由于这种旋转,MOM可以很容易地从立式显微镜转换成倒置显微镜,物镜可以从0度到180度定位。这种位置自由度允许非水平表面和体积的成像。
MOM扫描系统
在过去的10年中,多光子显微镜的扫描系统在几个方面发生了变化。大孔径、高NA物镜成为可能,因此需要更大孔径的扫描仪。共振扫描仪技术允许更快的成像。双光子观测仪现在包括共振检流计和共振检流计系统。Sutter MOM与这些变化并行开发,新技术可以通过最小的变化被固定到旧的现有观测仪中。许多带有3毫米检流计扫描仪的原始示波器已经升级到6毫米检流计扫描仪或谐振/检流计扫描仪。例如,维德里奥RMR扫描仪(一种谐振振镜-振镜扫描仪系统)可以作为任何新的MOM系统的一部分购买,或者改装到现有的MOM示波器中。
成像软件
从2011年开始,Sutter开始提供MOM计算机系统和软件(MCS)。在这个软件包开发出来之前,大多数用户依赖ScanImage或MPScope来生成扫描图像。客户重视MOM将与开源免费软件一起运行的事实,然而,商业软件包似乎也有市场。MCS继续提供简单易用的软件包,其价格与其他商业和免费软件包相当。最新版本的MScan 3.0兼容Windows 10。最近的一份出版物利用了可以在MCS专有数据文件结构中捕获的长(1-2小时)数据文件。(参考库恩,2020)。
MOM一直与ScanImage免费软件兼容,后者是由Karel Svoboda及其合作者开发的双光子成像软件。MOM平台以目前的形式存在的原因之一是来自ScanImage社区的强大支持。2014年,维德里奥成为支持和新开发ScanImage的主要工具。萨特很高兴使维德里奥ScanImage Premium可用于希望获得高级支持和最新功能的客户。ScanImage Basic作为入门级系统提供,包括一年的支持。ScanImage免费软件仍然可用,但不包括支持。Sutter提供的套件包括将MOM和其他扫描显微镜连接到ScanImage Premium、ScanImage Basic或免费软件版本所需的数据采集硬件。我们还销售维德里奥的硬件系列,包括ScanImage ready计算机、vDAQ采集系统和RMR扫描仪。
Sutter MOM套件包括完整成像系统所需的所有设备(不包括激光器和物镜):
- 适用于双光子或三光子成像的扫描透镜和镜筒透镜
- 剑桥技术XY检流计(3毫米或6毫米)或共振扫描仪(共振检流计或共振检流计-检流计系统,均带有5毫米镜子)
- 滨松光电倍增管:R6357多碱或H10770PA-40 (GaAsP)产品。(其他PMT可用,Sutter是Hamamatsu的授权经销商)
- PMT的电源:Sutter PS-2(传统PMT的双通道高压电源)或Sutter PS-2/LV(h 10770 pa-40或其他内置高压PMT的双通道低压电源)。可以订购电源,远程打开/关闭PMT门控
- Hamamatsu、Sigmann或FEMTO前置放大器
- 数据采集:基于多功能I/O的国家仪器PXI FPGA、维德里奥vDAQ或国家仪器PC
- 用于激光强度控制的圆锥光学普克尔盒
应用程序在活生物体内双光子成像
在活生物体内三光子成像
- 电生理记录和成像(培养,大在活生物体内准备工作等。)
- 非水平表面显微术
- 同时视网膜刺激和双光子显微镜检查1
- 整体动物成像
- 免疫学
- 胚胎学
特征- 物镜在X、Y和Z方向移动22毫米
- 物镜绕光轴旋转,用于非水平表面和体积的成像
- 可定制的开放平台设计
- 剑桥技术常规或共振XY扫描仪
- 带Hamamatsu PMTs和前置放大器的双通道或四通道检波器系统
- 萨特PS-2/ PS-2LV双通道PMT电源
- 双光子或三光子兼容扫描透镜和镜筒透镜
- *新的*挡光板将视觉刺激、光刺激和环境光阻挡在检测器路径之外
国家仪器公司和维德里奥技术公司的数据采集系统
萨特仪器中继RGG扫描盒
许多神经成像实验室正在寻找方法来增加标准检流计(GG)或共振检流计(RG)扫描双光子显微镜的功能。升级到谐振振镜-振镜扫描(或RGG扫描)是为您的系统添加新功能的一种方式。新的萨特RGG扫描盒在紧凑的外形中增加了新的功能。
RGG扫描盒的优点是什么?
1)在单一激光路径范围内,RGG可以作为GG或RG路径。可以使用RG模式进行快速扫描以监测成像钙水平的变化(命令第二个检流计扫描仪保持在中间位置),或者可以在GG模式中进行较慢的高分辨率扫描(命令共振扫描仪以零伏停止共振)。
2)许多实验者希望能够光刺激视野的一部分(FOV)或细胞的单个部分,以依次光激活一个或多个小区域,然后进行快速RG扫描,以观察细胞如何对光刺激做出反应。这通常只能通过两条扫描路径来实现,一条是RG,一条是GG。RGG扫描盒允许用单一扫描路径来完成,使设计更简单。
3)最后,有时称为“邮票”或“感兴趣区域”(ROI)扫描的方法可用于限制暴露于激发光的区域,并且在某些情况下,还允许更快的扫描。
你为什么想让萨特转播RGG扫描盒?
1)像其他设计一样,我们的RGG光路将共振扫描仪的旋转中心传递到第一个检流计的旋转中心。与其他设计不同,我们不依赖基于透镜的中继系统,因此我们比基于透镜的中继扫描仪保持更高的功率,并导致更少的脉冲分散。
2)它的设计适合Sutter MOM,因此也适合Sutter DF-Scope。RGG扫描盒将在“简单2P”和鲍勃-2P显微镜中提供。中继系统使设计保持较小(6×6×2英寸),因此它将适合任何数量的传统扫描范围。我们预计通用中继RGG扫描盒将很快推出。
3)你可以期待萨特质量,技术支持以及售前支持,就像我们所有的其他产品。
技术条件
旅行
所有三个轴上均为22毫米
解决
MP-285控制器
低:0.2米/步
高:0.04米/步
MPC-200控制器
0.0625米/步
全速
MP-285控制器
2.9毫米/秒
MPC-200控制器
5.0毫米/秒
长期稳定性
1-2/小时
驱动机构
精密蜗轮绞盘驱动
沟通
MP-285:RS-232串行
MPC-200:通用串行总线
与电有关的
115/230伏
50/60赫兹电力线
LAMBDA LS 300W氙弧灯
灯的寿命
1,000小时(500小时保修)
更长的寿命取决于应用
与电有关的
115/230伏
50/60赫兹电力线
PS-2/PS-2LV PMT电源
与电有关的
115/230伏
MDR-3/MDR-6/MDR-R扫描驱动控制器
与电有关的
115/230伏
50/60赫兹电力线